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染料法熒光定量PCR試劑盒所用實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)解析

更新時(shí)間:2021-07-19 點(diǎn)擊量:3572
   染料法熒光定量PCR試劑盒通過(guò)對PCR擴增反應中的每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實(shí)時(shí)監測從而實(shí)現對起始模板的定性及定量分析。目前它主要通過(guò)兩種方式一熒光染料或者熒光標記的探針對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標記跟蹤,實(shí)時(shí)在線(xiàn)監控反應過(guò)程,并結合相應的軟件對產(chǎn)物進(jìn)行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。
  染料法熒光定量PCR試劑盒采用的實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項重要技術(shù),是快速檢測基因表達水平的快捷方法,是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過(guò)內參或者外參法對待樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量的分析。高靈敏度、高重復性、高分辨率、動(dòng)力學(xué)范圍廣,儀器穩定性有保障,數據能夠比較真實(shí)的反映出樣品中RNA的相對含量變化。
  染料法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):
  1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準確快速。
  2. 根據TB 基因的保守序列設計引物,引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性高。
  3. 采用了改良后的Taq Polymerase,具有高擴增效率,高擴增靈敏度,高擴增特異性的特點(diǎn)。
  4. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
  熒光染料法:在PCR反應體系中,加入過(guò)量熒光染料,該染料只與雙鏈DNA小溝結合,并不與單鏈DNA鏈結合,而且在游離狀態(tài)不發(fā)出熒光,只有摻入DNA雙鏈中才可以發(fā)光,因此,在PCR體系中,隨著(zhù)特異性PCR產(chǎn)物的指數擴增,每個(gè)循環(huán)的延伸階段,染料摻入雙鏈DNA中,其熒光信號強度與PCR產(chǎn)物的數量呈正相關(guān)。
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