胎牛血清作用主要體現在哪些方面: 1、提供維持細胞指數生長(cháng)的激素、基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。
2、起酸堿度緩沖液作用。
3、有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4、提供結合蛋白,能識別并結合維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能調節它們所結合物質(zhì)的活力。
5、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
6、提供蛋白酶抑制劑,細胞傳代時(shí)能使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時(shí),須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì )變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩定的成份也會(huì )因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì )造成沉淀物的增多。
胎牛血清作凍融方法和注意事項:
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小時(shí)左右使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。
切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來(lái)的血清直接放在水浴中,無(wú)論室溫的水或者37℃的水,因為在水浴中血清迅速熔化,很大的溫差(-20℃到37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清產(chǎn)生沉淀。
血清應該在-10℃以下保存。若一次無(wú)法用完一瓶,應該無(wú)菌分裝,再冷凍保存。