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人ELISA試劑盒

人ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號: XY-9001E

所屬分類(lèi):Human/人檢測試劑盒

更新時(shí)間:2022-01-24

詳細說(shuō)明:

 人ELISA試劑盒

人ELISA試劑盒檢測原理:

信裕生物生產(chǎn)的ELISA試劑盒采用抗體夾心法:將抗抗體包被于酶標板上,標本和標準品中的與抗體結合,加入生物su化的抗抗體,再加入ABC復合物與生物su抗體結合,形成免疫復合物,然后加入TMB顯色底物,顯色劑顯藍色,加終止液變黃色,游離的成分被洗去。在450 nm處測OD值,濃度與OD值之間呈正比,可通過(guò)繪制標準曲線(xiàn)計算出標本中的濃度。

檢測范圍:0.156-10ng/ml

靈敏度:0.094ng/ml

標本收集與試劑準備:

1、血清、血漿樣本收集應使用一次性的無(wú)熱原,無(wú)內毒素試管(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝均可),血清、血漿避免使用溶血,高血脂標本,標本懸浮物應離心去除,使標本清澈透明。待測樣本應盡早檢測,2-8℃保存48小時(shí);更長(cháng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-80℃)保存,避免反復凍融。

2、洗滌液配置:用蒸餾水1:20稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃縮洗滌液加入19ml的蒸餾水)

3、標準品配制:取7個(gè)1.5ml離心管,分別標注1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。從至七管中分別加入標準品/樣品稀釋液300ul。在一管中加入標準品溶液300ul(標準品濃度),置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡诹苤形?00ul棄去,第七管為空白對照。(建議標準曲線(xiàn)使用以下濃度: 1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank)。

4、生物su化抗體工作液配置:使用前20分鐘,用生物su化抗體稀釋液將100×生物su化抗體稀釋成工作液,根據所需用量配置,當日使用,剩余棄之。

5、ABC復合物工作液配置:使用前20分鐘,用ABC復合物稀釋液將100×濃縮ABC復合物稀釋成工作液,當日使用,剩余棄之。

6、如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品值,建議重新檢測,請根據實(shí)際情況,適當倍數稀釋(建議做預實(shí)驗,以確定稀釋倍數)。

檢測程序:

1、微孔板使用前洗板2次,向濾紙印干后,請立即使用。

2、加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板混勻后置37℃,90分鐘,然后甩去酶標板內液體,向濾紙上印干,不洗板。

3、每孔加入的生物su化抗體工作液100ul,混勻后置37℃,60分鐘。

4、洗板:用洗滌液將微孔板充分洗滌3次,向濾紙上印干。

5、每孔加入的ABC復合物工作液100ul,混勻后置37℃,30分鐘。

6、洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌5次,向濾紙上印干。

7、每孔加入底物工作液90ul,混勻后置37 ℃暗處反應3-20分鐘(具體顯色時(shí)間根據顯色結果而定)。

8、每孔加入50ul終止液,混勻,30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。

結果判斷與計算:

1、所有OD值建議減除空白值后再行計算,如空白OD低于0.1,也可以直接計算。

2、以標準品濃度作橫坐標,OD值作縱坐標,手工繪制或用軟件繪制標準曲線(xiàn),根據樣品OD值計算出相應含量,再乘上稀釋倍數即可。

注意事項:

1、在試驗中標準品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測,每次檢測都應做標準曲線(xiàn)。

2、洗滌過(guò)程很關(guān)鍵,洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高,從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能 有結晶,屬于正?,F象,37℃水浴使結晶*溶解后再配制洗滌液。

3、檢測時(shí)所有試劑都要恢復到室溫,板條開(kāi)封后剩余板條需封好,放回袋中個(gè)月內用完。

4、試劑盒使用超敏TMB溶液,若顯色過(guò)深會(huì )出現絮狀物,屬正?,F象,不影響結果判讀。

5、僅用于科研,不能用于臨床診斷!

 

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