Super ECL Plus（超敏化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒）

簡(jiǎn)要描述：Super ECL Plus（超敏化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒）

產(chǎn)品貨號：S6009M

產(chǎn)品規格：100 mL

儲存條件：4℃密封避光保存，短期可放置于室溫。有效期見(jiàn)外包裝。

產(chǎn)品型號： S6009M

所屬分類(lèi)：分子生物學(xué)

更新時(shí)間：2024-05-23

Super ECL Plus（超敏化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒） 

產(chǎn)品貨號：S6009M

產(chǎn)品規格：100 mL

儲存條件：4℃密封避光保存，短期可放置于室溫。有效期見(jiàn)外包裝。 

產(chǎn)品介紹：

Super ECL Plus 免疫印跡底物是增強型化學(xué)發(fā)光（ECL） 過(guò)氧化物酶的底物，可幫助用戶(hù)在免疫印跡分析過(guò)程中實(shí)現 低表達或高價(jià)值蛋白的檢測。 Super ECL Plus 底物可為使用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶 聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗提供明亮的信號，對低表達或高價(jià)值蛋 白檢測靈敏度很高。該 ECL 底物能夠兼容各種膜、封閉液 和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性?xún)r(jià)比，滿(mǎn) 足用戶(hù)的免疫印跡應用需求。 Super ECL Plus（超敏）特點(diǎn)： 1. 具有靈敏度：檢測硝化纖維素膜或 PVDF 膜上低表 達或高價(jià)值的蛋白條帶； 2. 長(cháng)信號持續時(shí)間：條件優(yōu)化的情況下，經(jīng)底物孵育的印 跡條帶能夠持續輸出 6 至 8 h 的可檢測光信號； 3. 價(jià)格經(jīng)濟：配方經(jīng)過(guò)優(yōu)化，適用于濃度極低的抗體檢測。 • 0.2-1 μg/mL 一抗（或 1 mg/mL 的稀釋 1:1,000-1:5,000） • 10-50 ng/mL 二抗（或 1 mg/mL 的稀釋 1:20,000-1:100,000）

使用方法：

1. 執行常規 SDS-PAGE 電泳、轉膜和 Western Blot 步驟，1.0-0.2 μg/mL 一抗室溫孵育 1 h 或 4℃過(guò)夜，洗膜后，10-50 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。 2. Western Blot 最后一次洗膜時(shí)，新鮮配制發(fā)光工作液：分 別取等體積的溶液 A 和 B，混勻。 注：建議立即使用工作液，室溫放置數小時(shí)后仍可使用但靈 敏度略有降低。 3. 成像儀檢測：用鑷子取出 PVDF 膜置于成像儀檢測板上， 含蛋白面朝上，瀝干洗液但勿使膜干燥。將發(fā)光工作液 （0.125 mL 發(fā)光工作液/cm2 膜）滴加在 PVDF 膜上，使發(fā) 光液覆蓋 PVDF 膜，室溫孵育 3-5 min，參考儀器說(shuō)明 書(shū)進(jìn)行檢測。 4. 壓片檢測：用鑷子取出 PVDF 膜置于保鮮膜上，含蛋白 面朝上，瀝干洗液但勿使膜干燥。將發(fā)光工作液（0.125 mL 發(fā)光工作液/cm2膜）滴加在 PVDF 膜上，使發(fā)光液覆蓋 PVDF 膜，室溫孵育 3-5 min，棄發(fā)光工作液，用保鮮 膜包好，將膜固定于片夾內，含蛋白面向上。暗室內壓片 1 min，立即顯影，根據結果再調整壓片時(shí)間?；蚍謩e壓片 0.5、 1、3、5 min，然后一起顯影觀(guān)察結果。

注意事項：

1. 發(fā)光液曝露于強光下時(shí)間過(guò)久靈敏度可能有降低，操作 時(shí)注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。 2. 長(cháng)時(shí)間曝光會(huì )加深背景；蛋白過(guò)量，會(huì )使條帶強弱變化失去線(xiàn)性關(guān)系；曝光不足，則條帶模糊或較淺。 3. 如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育 二抗，然后重新用 ECL 曝光。 4. 使用肉眼可見(jiàn)的預染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。 5. NaN3 會(huì )抑制 HRP 活性，回收二抗應避免使用 NaN3，如 必需使用勿超過(guò) 0.01%。